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南京信帆為大家詳述關(guān)于ELISA試劑盒的構(gòu)成以及測定步驟

更新時(shí)間:2014-02-11      瀏覽次數(shù):2226

ELISA試劑盒擁有穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠,是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。下面以96T的為例來給大家介紹關(guān)于ELISA試劑盒的構(gòu)成以及測定步驟:

  試劑盒組成

130 倍濃縮洗滌20ml×1 瓶7終止液6ml×1 瓶
2酶標(biāo)試劑6ml×18標(biāo)準(zhǔn)品(32ng/ml)0.5ml×1 瓶
3酶標(biāo)包被板12 孔×8 條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶
4樣品稀釋液6ml×1 瓶10說明書1 份
5顯色劑A 液6ml×1 瓶11封板膜2 張
6顯色劑B 液6ml×1 瓶12密封袋1 個(gè)

 完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:

  (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

  (2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);

  (3)酶的底物;

  (4)陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);

  (5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;

  (6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;

  (7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。

 測定步驟                            
1.加樣                            
    1. 除包被外都需45度加樣                        
    2.加樣體積要準(zhǔn)確                        
    3.管底加樣,不能加在管壁上                        
    4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡                        
2.溫浴                            
    1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。                        
    2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。                        
    3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。                        
    4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。                        
3.洗滌                            
    1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。                        
    2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。                        
4.讀板                            
    1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。                        
    2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

南京信帆專業(yè)代理銷售ELISA試劑盒,提供技術(shù)指導(dǎo),售后服務(wù)!如果你有不清楚的地方,歡迎大家來電來函!我們一定竭誠為大家提供的服務(wù)!

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