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南京信帆告訴你Elisa實(shí)驗(yàn)中牛奶樣本收集方法

更新時(shí)間:2015-11-14      瀏覽次數(shù):2043

(a)牛奶前處理方法

┅┅取牛奶樣本,3000g以上,10℃離心10min,吸除上層脂肪;

┅┅取5ml去除脂肪牛奶樣本至10ml聚苯乙烯離心管中,加入150ulC液(見配液1)出現(xiàn)沉淀,振蕩15s,再加入150ulD液(見配液2),振蕩1min充分混合;

┅┅3000g以上,15℃離心10min,移取上層液;

┅┅用復(fù)溶工作液(見配液6)以等體積稀釋上層液(1份上層液+1份復(fù)溶工作液);

┅┅取50ul用于分析。

注:如果離心后仍然渾濁,再重復(fù)脫脂過程。   

(b)牛奶前處理方法

┅┅取牛奶樣本,3000g以上,10℃離心10min,吸除上層脂肪;

┅┅取5ml去除脂肪牛奶樣本至10ml聚苯乙烯離心管中,加入250ulC液(見配液1)和250ulD液(見配液2)充分混合,3000g以上,4~12℃離心10min。(如沒有冷凍離心機(jī),請預(yù)先將樣本冷卻到8℃再進(jìn)行離心);

┅┅移取2.2ml上層液(相當(dāng)于2ml奶樣)至另一個(gè)10ml聚苯乙烯離心管中,加入4ml乙酸乙酯上下振蕩10min;

┅┅3000g以上,室溫(20-25℃)離心10min ;

┅┅移取2ml乙酸乙酯上層有機(jī)相(相當(dāng)于1ml奶樣),至10ml干凈的玻璃試管中,于50~60℃水浴氮?dú)饬飨麓蹈桑?/p>

┅┅加入0.5ml復(fù)溶工作液(見配液6),渦動(dòng)2min溶解干燥的殘留物;

┅┅取50ul用于分析。

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